Justin W. Chambers se narodil 11. července 1970 ve Springfieldu v Ohiu. Má bratra-dvojče, který se jmenuje Jason. Dále má tři starší bratry a dvě sestry. Jeho kariéra začala díky modelingu. Pracoval pro značky Calvin Klein, Armani a Dolce & Gabbana. Procestoval Evropu, Japonsko a USA.
Chambers je od roku 1993 ženatý s Keishou Chambers, se kterou má pět dětí: Isabellu, dvojčata Mayu a Kailu, Evu a Jacksona. Společně žijí v Los Angeles. Na začátku letošního roku byl Chambers dobrovolně hospitalizován na UCLA Medical Centre kvůli opakující se poruše spaní a vyčerpání. Kliniku opustil o dva dny později.