John Soursby Glover sa narodil v meste Kingston do rodiny Cade a Johna Gloverových (otec pracoval ako obchodný zástupca jednej televízie). Navštevoval strednú školu Wicomico v Salisbury, Mariland.
John Glover započal svoju filmovú kariéru v roku 1973, keď sa na scéne objavil vo filme SHAMUS, v ktorom získal malú rolu. Za zmienku stojí jeho vystupovanie ako člena gangu vo filme PAYBACK, alebo tiež v snímkach 52 PICK-UP, SCROOGED, GREMLINS 2: THE NEW BATCH, či ROBOCOP 2. Jeho hlas taktiež rozozvučnil niektoré animované postavičky (BATMAN).
Glover vystupoval vo veľkom množstve TV filmov a seriálov, jeho najčastejšou rolou je záporný charakter - ako môžeme vidieť aj v seriáli SMALLVILLE, kde hral postavu bohatého záporáka Lionela Luthora. V tomto seriáli počas prvej série iba hostoval, avšak od druhej série až po jeho finálnu siedmu sa stal plne obsadeným hercom.
Medzi jeho úspechy patrí nominácia na Emmy z roku 1994 za vystupovanie v komédii FRASIER. Taktiež získal ocenenie Tony Award za divadelnú úlohu na Brodwayi v hre "Love! Valour! Compassion!", čo zopakoval aj pri sfilmovanej verzii.