Uršula Kluková má původ v Praze, ale v nejistých dobách druhé světové války přišla na svět v Polsku. Dětství a mládí pak strávila ve východočeském Broumově, kde se dodnes cítí doma. Vystudovala střední zdravotnickou školu a začala pracovat jako dětská zdravotní sestra, souběžně se ale začala věnovat divadlu a v Broumově spoluzakládala amatérský soubor Kladivadlo, který po profesionalizaci začal působit v Ústí nad Labem (1965-1972). V Kladivadle se setkala s řadou později významných hereckých osobností, například s Josefem Dvořákem nebo Jiřím Císlerem. Po zrušení Kladivadla hrála v ústeckém Činoherním studiu (1972-1974), od poloviny 70. let pak působí v Praze, původně v Divadle Ateliér, později v Semaforu, následně pak v Divadle Jiřího Grossmanna, v poslední době hrála v Prozatímním divadle F. R. Čecha, pohostinsky účinkovala také v Divadle Pavla Trávníčka (Čachtická paní) nebo v Rokoku (Pomsta Karamby L., Hrobka s vyhlídkou). V 90. letech se prosadila i sama tříletým působením ve vlastním představení jednoho herce Příhody lišky Uršuly. Uršula Kluková se vypracovala ve svébytného ženského komika s charakteristickým smíchem, a i když se její hraní svým způsobem jeví jako stereotypní, má rozhodně své místo na poli veseloherního žánru. Naopak pokusy režisérů prosadit ji i do vážnějších rolí (například v Činoherním studiu) nedopadly příliš šťastně.
Uršula Kluková je rozvedená, jejím manželem byl scénárista Pavel Fiala (*1937), s nímž má syna Jakuba.