Reginald Barker se krátce poté, co se narodil v Kanadě ve Winnipegu, přestěhoval se svým otcem Nealem Dowem Barkerem a matkou Catherine Smith do Skotska. Ani tam však nebyla rodina doma, a tak nakonec emigrovali do USA a usadili se v Kalifornii.
Zjistil, že rozvíjející se filmový průmysl se ukázal zajímavější než scéna a v roce 1912 nastoupil do společnosti Bison Motion Pictures pod záštitou Thomase H. Ince. Brzy opustil herectví a začal pracoval jako asistent režie. Ve spolupráci s Williamem S. Hartem potvrdil své kvality a začal sám režírovat celovečerní filmy. Jako režisér debutoval v roce 1912 s filmem On the Warpath (1912).
V roce 1920 byla založena filmová produkční společnost Reginald Barker Productions. Tři jeho filmy, které byly vybrány do Národního filmového registru Kongresovou knihovnou jako „kulturně, historicky nebo esteticky“ významné, jsou: The Bargain (1914), The Italian (1915) a Civilizace (1916).
Barker během své kariéry režíroval téměř 100 filmů a pracoval s hvězdami jako Sessue Hayakawa, Hoot Gibson nebo Myrna Loy. Jen pár let po filmu Seven Keys to Baldpate (1929), prvním zvukovém filmu společnosti RKO, jeho popularita pohasíná. Svůj poslední film režíroval v roce 1935 a potom odešel z filmového průmyslu, protože jeho hvězda stále upadala a velká studia s ním přestávala spolupracovat.