Hrát začala jako dítě v postupimské divadelní skupině Taifun. Další dětské role ztvárnila tamtéž, v Hans-Ottově divadle. V letech 2000 až 2003 si zahrála v dětském seriálu SCHLOSS EINSTEIN. Role intrikářky Anny ji přinesla popularitu a posun k vážnějšímu repertoáru. Roku 2004 převzala moderování dětského pořadu Quergelesen, který se věnoval knižní tvorbě pro děti a mládež. Ve stejném roce si zahrála Nessie v teenegerské komedii KLASSENFAHRT – GEKNUTSCHT WIRD IMMER. Po roce ji společnost Pro7 oslovila znovu, nabídkou hlavní role ve filmu SCHÜLERAUSTAUSCH – DIE FRANZÖSINNEN KOMMEN.
Nadabovala též několik zahraničních filmů. Josefine Preuß je na svůj věk velmi plodnou herečkou, ale dalo by se říci, že z množstvím klesá kvalita. Její filmografie čítá (ke konci roku 2015) 11 celovečerních filmů, 23 tv filmů, 26 tv seriálů a 26 rozhlasových her. Některé kritiky jsou oprávněné, ale i kritika se jí nakonec zastala slovy: "... nelze každý den stvořit Mona Lisu ... ". V roce 2014 obdržela cenu Bambi za film DIE HEBAMME.