Jiří Mikota se původně vyučil zámečníkem, poté absolvoval strojní průmyslovou školu a za války začal pracovat jako konstruktér. Již od třicátých let se ale zároveň věnoval divadlu a vystupoval na ochotnických scénách. Po válce pak nastoupil do svého prvního profesionálního angažmá, a sice v Městském divadle v Teplicích (1945-1948), po třech letech pak přešel do Divadla pracujících ve Zlíně (1948-1953), kde vynikl ve hrách Strakonický dudák nebo Jan Žižka. Ze Zlína pak přešel do Prahy a až do odchodu do důchodu hrál v Realistickém divadle Zdeňka Nejedlého (1953-1989). Nedostával sice hlavní role, ale uplatnil se v širokém spektru žánrů i postav, jejichž charakteristika vyplývala především z hercova mužného zjevu a sytého hlasu.
Manželkou Jiřího Mikoty byla herečka a televizní režisérka Marie Mikotová, rozená Müllerová (*1920); manželský pár spolu hráli v povídkovém filmu PĚT Z MILIÓNU (1959).