Jo Van Fleet svoji kariéru zahájila na Broadwayi, kde zaujala jako dramatická herečka a v roce 1954 získala cenu Tony za svůj výkon v nelehké úloze nesympatické až hrubé Jessie Wattsové z Footeovy hry “Výlet do městečka Bountiful.” Do světa filmu vstoupila rolí matky Jamese Deana: NA VÝCHOD OD RÁJE (1955) a hned tento její debut jí přinesl Oskara pro “nejlepší herečku ve vedlejší roli.”
V roce 1958 byla opět nominována na cenu Tony za roli Elizy Gantové ve hře “K domovu pohleď, anděle!” K dalším jejím filmům patří drama s Montgomery Cliftem DIVOKÁ ŘEKA (1960), kdy se podruhé sešla s režisérem Kazanem, FRAJER LUKE (1967) vedle Paula Newmana, komedie s Peterem Sellersem MILUJI TĚ, ALICE B. TOKLASOVÁ (1968) nebo Polanského mysteriózní thriller NÁJEMNÍK (1976).
Van Fleetová si v roce 1946 vzala Williama Balese, se kterým žila až do jeho smrti. Sama zemřela v 81 letech v newyorském Queensu, přesná příčina její smrti není známa. Zanechala po sobě syna Michaela Balese a vnuka Ardena Rogow-Balese. Za přispění filmovému průmyslu má na dnes tato představitelka smělých a neohrožených dam svoji hvězdu na Hollywoodském chodníku slávy.